柱后衍生设备的故障检修

发布日期:2022-05-26 00:00

l全面检查系统, 处理漏液问题。

l对设置参数、缓冲液、试剂、阀等根据说明进行核实。

l 系统是否有改变

l根据文献条件对比:标准样品、色谱柱、参数日志是否有变化。

l收集信息: 观察信息、手册、书、技术支持。

l得出关于问题原因的结论

l开始工作

l在改变梯度、温度或其它操作条件之前, 针对同一问题至少连续得到两张色谱图。 改变之后, 至少有两张色谱图显示了同样的改变效果。 尤其是在优化梯度条件的时候

现象

原因

解决方法

注意事项

试剂压力低

1 试剂泵中存在气泡

2 试剂流速低

3 接头漏液

1 检查气泡

2 检查泄漏

3 检查泵密封圈的完整性

将漏液的接头拧紧

试剂压力高

1 沉淀物堵塞流路

2 接头拧的过紧

3 检测器流通池的堵塞

4 背压调节器故障

首先, 确定堵塞的精确位置。

下来一次断开一个位置, 从背压

调节器端向前直到压力下降。

A:部分堵塞,清洗管路。

B:完全堵塞,更换配件。

试剂泵不工作或

流速错误

 

1 检测泵的设置

2 检查试剂增压

3 检查泵的密封圈是否泄漏

4 清洗止回阀

 

过压泻放阀打开

系统有堵塞

首先, 确定堵塞的精确位置。

下来一次断开一个位置, 从背压

调节器端向前直到压力下降。

冲洗系统直到压力降低,或更换适当组件。

常见色谱问题

现象

原因

解决方法

注意事项

背景信号高

1 洗提液污染

2 细菌生长

3 试剂污染

4 化学品不纯

5 指印

清洗所有的试剂瓶并冲洗管线

柱后衍生反应对轻微的污染都很敏感

基线噪音

1 旧的泵密封

2 止回阀故障

3 检测器噪音

4 化学品污染

5 试剂过期

1 检查噪音的样式

2 如果背景信号也提高,

检查化学品是否污染或者是否后配置错误。

检查噪音的频率是否与泵的频率一致。

如果噪音是随机的, 检查检测器。

峰减小或消失

1 不恰当的试剂配制

2 未与水解试剂反应

3 反应器温度设置错误

4 试剂流速设置错误

5 流通池污染

6 自动进样器污染

7 样品污染

8 色谱柱被金属离子污染

9 样品制备问题与系统腐

10 TRIONE®或 OPA 氧化

11 试剂泵未校正。

12 色谱柱铁离子污染

1 制备新鲜的试剂

2 重新配制标准品

3 用荧光检测器检测

4 更换进样器的转子密封

5用 Li220或 Na220 清洗氨基酸柱

6 检查反应器温度

7 检查试剂的氧化

8 清洗流通池

9 清除铁污染

10 除去试剂瓶中的不锈

钢筛板。

11 清洁或更换被腐蚀的组件。

除了 1-萘酚、 胺甲萘所有的

峰都消失= OPA过期

除了 1-萘酚所有的峰都消失

=水解试剂

峰大小变化=流通池、自动

进样器污染或样品降解。

所有峰消失=流通池、自动

进样器污染或样品降解。

样品储存问题

检测器设置

铁污染可能来自样品、柱寸

时间过长、洗提瓶中的不绣

钢筛板和系统的腐蚀。

保留时间不 稳定

1 平衡时间短

2 内体积太大

3 HPLC 比例阀泄漏

4 自动进样器故障

1 以每次 2 分钟增加平衡时间

2 重连系统, 按氨基酸安

装部分

 

假峰

1 洗提液试剂瓶的污染

2 喷射线或过滤器的腐蚀

3 挥发性胺

1 更换洗提液

2 用肥皂和水清洗时间瓶

3 去掉喷射线或过滤器

4 清除在氨基酸合成时使

用的试剂

 

后基线飘移

1 污染物的生长

2 室温的变化

1 冲洗色谱柱

2 控制室内温度

 

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