移液器的使用和保养

发布日期:2019-11-26 09:00

一、液体移取的两种原理

1、气体活塞式原理

 工作原理:通过弹簧的伸缩运动推动活塞,排除部分空气,利用大气压吸入液体;再由活塞推动空气排出液体。

液体和活塞之间有空气柱。适用于常规水性溶液。

 2、外置活塞式原理

工作原理:通过分液管或吸头内活塞的连续运动移取和打出液体。活塞和液体直接接触,没有空气柱。除适用于常规水性溶液外,还特别适用于高粘度、易挥发、易起泡等问题液体。

二、液体移取的工具

1、气体活塞式原理

 单按钮操作,指的是吸液、放液、脱卸吸头一步到位,有效避免液体反弹,减少气溶胶污染。

2、外置活塞式原理

三、移液器的正确操作

1 选择适合量程的移液器

移液器最大量程的30%—100% 是最佳使用范围。

2 挑选合适的吸头

吸头和移液器同等重要,只有使用高质量的吸头才能完全体现移液器的精确性(推荐使用厂家原装吸头)。

滤芯吸头可防止气溶胶污染,适合细胞培养、防污染及所有需要高精准度的实验。

 双层滤芯层,下层可过滤水滴、溅射和大气溶胶,上层可有效阻断近100%的气溶胶和生物分子。

 有效阻断了气溶胶及生物分子,避免造成移液器内部污染及对下次吸取样品的二次污染。

 低吸附吸头适用于移取含表面活性剂(含去垢剂溶液或缓冲液)的样品,确保最大样品回收率。

3 装配吸头 

将移液器吸嘴垂直插入吸头,轻压上紧,切勿上下敲击或左右摇晃,否则有可能损坏移液器内部零件。

移液器具有弹性吸嘴功能,在降低装配/脱卸吸头用力的同时,确保吸头装配气密性且提高移液均一性。

4 调节刻度

旋转刻度调节旋钮,从大量程调节至小量程,精度最佳;从小量程调节至大量程,最好先调至略大一点,再返回。移液器不使用时,需要调节到最大刻度处,以保护弹簧。

 移液器体积显示框在前面,方便操作时观察;且体积四位数显示,保证精准度。

5 吸取液体

1)保证垂直吸液;根据流体静力压原理,移液器斜着吸液将使体积偏大。

2)吸头尽量浸没得浅一些,防止液体残留在吸头表面;但是同时要浸没得足够深,防止吸取空气。

3)至少预润湿3次,使得空气柱充满饱和的液体分子(特别是在移取易挥发性液体时)。

4)吸、放液体应该缓慢、匀速,以提高移液精准性。推荐使用电动移液器,电动马达驱动,减少人为误差,提供精准度。

5)吸取液体后稍稍停留一会儿(特别是对于大量程移液器)。

      对于小量程(小于1mL),暂停至少1秒钟

      对于大量程(大于1mL)和粘度较高样品,停留3-5秒后移出

6 打出液体

放液时吸头尖端靠在容器内壁(特别是对于20 μL以下的体积),移液器角度20°-45°。体积低于10 μL 直接放液到容器底部。

四、保养和校准

校准= 系统(移液器和吸头)的性能测试

保养= 清洁、润滑 

系统误差 & 随机误差

系统误差(不准确度)

实际测得(比如10次)的平均值与设定值的误差

随机误差(不精确度)

每次实际测得(比如10次)的值与平均值的误差

五、移液器的拆卸

拆卸单道

1 按住释放吸头的按钮后拔出套筒

2 按移液器上的英文提示 ”PUSH UP TO RELEASE” 向上轻推,取出下半部分移液器

 3 轻压弹簧固定帽

4 小心取出弹簧和活塞

 5 拆卸完成的移液器

 拆卸多道

1 轻轻向右扣动锁扣,即可取下下半部分

2 按下左右两边弹簧锁扣,即可打开盖板

六、移液器的清洁

1)外部清洁

使用含肥皂液、洗洁精或 60%异丙醇清洁液的湿布,去除移液器外部污垢,再用双蒸水淋洗,晾干即可。如果不是很脏,直接用双蒸水擦拭即可。

2)内部清洁

建议至少一年一次。如果移液器误吸入样品被污染,则需要立即进行内部清洁。

内部清洁可防止样品污染,并可提高移液器使用寿命。

内部清洁主要针对气体活塞式移液器(Research plus, Reference 2, Xplorer系列)下半支,外置活塞式分液器E3/E3x/M4 不需要清洁。

使用肥皂液、洗洁精或 60%异丙醇清洁套筒、活塞、弹簧等,并用双蒸水淋洗干净,晾干后再组装。如果污垢不是很明显,可使用蒸馏水蘸湿过的棉签清洁套筒、活塞、弹簧等部位,擦干后组装。

移液器的润滑

 润滑至少一年一次,可保证移液器精准度,并延长使用寿命。

1)先用干净的纱布或无尘纸将活塞上原有的润滑油抹去

2)再在活塞表面用棉签涂上一层薄薄的硅酮油脂

3)待组装好后,多次按压按键让油脂分布均匀

 多道移液器独立通道设计,可单独拆除进行润滑保养。润滑部位为活塞及O型圈

 七、移液器的消毒灭菌

 灭菌、消毒特别适用于细胞培养及其他需要防污染的实验室

1)高温高压灭菌

Research plus 和 Reference 2 手动移液器均可以整支高温高压灭菌

Xplorer /Xplorer plus 电动移液器下半支可以高温高压灭菌

M4/E3/E3x 分液器不可高温高压灭菌

2)UV 紫外线照射灭菌

避免对分液器/电动移液器的屏幕进行照射,其他移液器均可紫外灭菌

紫外灭菌只针对移液器表面,其内部无法达到消毒灭菌的目的

高温高压灭菌的方法

1) 用灭菌袋、锡纸或牛皮纸等材料包装灭菌部分(最好悬松移液器下半支,让蒸汽进入内部灭菌),于 121 °C,1 bar 下,灭菌 20 分钟

2)灭菌完成后,将移液器冷却至室温,晾干,安装即可

注意:

进行高温高压或紫外照射灭菌时,请勿使用任何额外的消毒剂、清洁剂或次氯酸钠。

对于 5 mL 和 10 mL 移液器,需除去旧的滤芯,高压灭菌后换上新的滤芯。滤芯只能高温高压灭菌一次。

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